产品及特点

牛棒状杆菌病(Bovine Corynebacteriosis)是指由棒状杆菌属(Coryne bacterium SPP.)的某些细菌引起的膀胱炎和肾盂肾炎。临床主要特征为频尿、浊尿、血尿和发热。该病主要见于成年母牛，多在妊娠期和产后发病。本病分布于世界各地。本产品是根据PCR原理开发的牛棒杆菌检测试剂盒，它具有下列特点：

1、即开即用，用户只需要提供DNA模板。

2、引物经过精心优化，专一性强，只扩增牛棒杆菌。

3、提供阳性对照，便于区分假阴性样品。

4、PCR mix中含上样染料，PCR后可以直接上样电泳。

5、本试剂盒足够做40μL体系的PCR 50次，但只能用于科研。

规格及成分

运输及保存

低温运输，-20℃保存，保存期限为一年。阳性对照需要单独放置，不要污染其他试剂。

自备试剂

样品DNA。

使用方法

一、样品DNA的制备

1、用自选方法纯化N+2个样品的DNA，本试剂盒跟市场上大多数核酸提取试剂盒兼容。

2、如果有N个样品，则需要做N+2个提取，包括一个样品制备阳性对照和一个样品制备阴性对照。样品制备阳性对照是在适量水(取决于试剂盒要求的样品起始量)中加10μL牛棒杆菌PCR阳性对照的10000倍稀释液而得，样品制备阴性对照是直接用水。提取结束后最后得到模板DNA放冰上待用。

二、设置PCR反应(40μL体系)

3、对N+2个样品，在PCR时需要增加一个PCR阳性对照和一个PCR阴性对照，故需要设置N+4个反应。在N+4个PCR管中分别加入下列成分：

4、按下表设置PCR反应：

三、电泳检测

5、取10-20 μL PCR产物。电泳检测PCR产物。本产品提供的PCR Mix在扩增结束后可以直接上样，不需要另外再加loading buffer。PCR产物阳性对照必须有预期条带出现，阴性对照必须无任何扩增，否则实验无效。对没有扩增产物的样品，可以稀释10倍后重复PCR扩增以排除PCR抑制剂的感染。