高保真(HF®)限制性内切酶具有与天然酶相同的特异性,但经过改造后显著降低星号活性,并使用统一的缓冲液(rCutSmart™ 缓冲液)。所有 HF 限制性内切酶均随附 6X 紫色凝胶上样染料。经过改造的内切酶与天然内切酶相比较,虽然价格相同,但性能和性价比更高:
高保真(HF)限制性内切酶在 rCutSmart 缓冲液中具有 100% 活性;统一缓冲液意味着更加直接、简化的样品处理过程。HF 内切酶还会显著降低星号活性。所有 HF 内切酶均符合省时酶(Time-Saver)标准,可在 5-15 分钟内酶切底物 DNA,也可实现过夜酶切而不会造成 DNA 降解。HF 限制性内切酶在改造时便将性能作为重要指标,可在更宽的条件范围下具有完全活性,最大限度地减少非特异性酶切产物,同时为实验设计提供灵活性。
产品来源
大肠杆菌菌株,携带有克隆自异常球菌属(
Deinococcus ra-diophilus)(ATCC 27603)并经修饰的 DraIII 基因。
特性和用法
单位定义
一个单位是指在 50 μl 的总反应体系中,37℃ 下,1 小时内酶切 1 μg λ DNA 所需的酶量。
反应条件
1X rCutSmart™ 缓冲液
Incubate at 37℃
1X rCutSmart™ 缓冲液
50 mM Potassium Acetate
20 mM Tris-acetate
10 mM Magnesium Acetate
100 μg/ml Recombinant Albumin
(pH 7.9 @ 25℃)
在不同缓冲液中的活性
NEBuffer™ r1.1:<10%
NEBuffer™ r2.1: 50%
NEBuffer™ r3.1: 10%
rCutSmart™ Buffer: 100%
稀释兼容性
贮存溶液
10 mM Tris-HCl
300 mM NaCl
1 mM DTT
0.1 mM EDTA
200 μg/ml BSA
50% Glycerol
pH 7.4 @ 25℃
热失活
否
甲基化敏感性
dam 甲基化: 不敏感
dcm 甲基化: 不敏感
CpG甲基化: 甲基化与酶切位点重叠影响酶切
同裂酶
AdeI
注意事项
对哺乳动物基因组 DNA 的酶切被某些 CpG 甲基化与酶切位点的重叠组合影响。