高保真（HF^®）限制性内切酶具有与天然酶相同的特异性，但经过改造后显著降低星号活性，并使用统一的缓冲液（rCutSmart^™ 缓冲液）。所有 HF 限制性内切酶均随附 6X 紫色凝胶上样染料。经过改造的内切酶与天然内切酶相比较，虽然价格相同，但性能和性价比更高：

• 为提高性能进行基因工程改造

• 在 rCutSmart 缓冲液中具有 100% 活性

• 符合省时酶（Time-Saver™）标准，可在 5-15 分钟内完成酶切

• 降低星号活性

• 随附 1 管 6X 紫色凝胶上样染料

• 限制性内切酶酶切位点：G/GTNACC

高保真（HF）限制性内切酶在 rCutSmart 缓冲液中具有 100% 活性；统一缓冲液意味着更加直接、简化的样品处理过程。HF 内切酶还会显著降低星号活性。所有 HF 内切酶均符合省时酶（Time-Saver）标准，可在 5-15 分钟内酶切底物 DNA，也可实现过夜酶切而不会造成 DNA 降解。HF 限制性内切酶在改造时将性能作为重要指标，可在更宽的条件下具有完全活性，最大限度地减少非特异性酶切产物，并且为实验设计提供灵活性。

产品来源

大肠杆菌菌株，携带有克隆自嗜热脂肪芽孢杆菌（Bacillus stearothermophilus）ET（N. Welker）并经修饰的 BstEII-HF 基因

• 特性和用法

  单位定义

  一个单位是指在 50 μl 的总反应体系中，37℃ 条件下，1 小时内酶切 1 μg λ DNA 所需的酶量。

  反应条件

  1X rCutSmart™ 缓冲液
  Incubate at 37℃

  1X rCutSmart™ 缓冲液
  50 mM Potassium Acetate
  20 mM Tris-acetate
  10 mM Magnesium Acetate
  100 μg/ml Recombinant Albumin
  (pH 7.9 @ 25℃)

  在不同缓冲液中的活性

  NEBuffer™ r1.1:<10%
  NEBuffer™ r2.1: 10%
  NEBuffer™ r3.1:<10%
  rCutSmart™ Buffer: 100%

  稀释兼容性

  贮存溶液

  10 mM Tris-HCl
  50 mM KCl
  1 mM DTT
  0.1 mM EDTA
  200 μg/ml Recombinant Albumin
  50% Glycerol
  pH 7.4                 @ 25℃

  热失活

  否

  甲基化敏感性

  dam  甲基化: 不敏感                        
  dcm 甲基化: 不敏感                        
  CpG甲基化: 不敏感

  同裂酶

  BstPI
  Eco91I
  EcoO65I
  PspEI
  

• 稀释液 A

• 注意事项

1. 在 3,000 多种已知的限制性内切酶中，只有少数几种内切酶能够产生超过 4 碱基的突出末端……

2. 基于反应中酶的稳定性，除非增加酶量，否则即便温育时间超过 1 小时也不会提高酶切效率。如需了解有关此主题的更多信息，请参阅限制性内切酶在反应中的活性。

3. 对 CpG、dcm 或 dam 甲基化均不敏感。